巴基斯坦查谟和克什米尔地区胃肠道患者乙型、丙型肝炎和艾滋病毒流行病学研究

毁灭整个世界的最终根源是肝炎。不规则影响肝细胞的五种肝炎病毒(HAV、HBV、HCV、HDV和HEV)是肝细胞慢性疾病的基础，并导致肝癌[1]。肝脏受兴奋细胞和脏器的影响。早期肝脏阶段的肝炎没有指征。慢慢地会变成皮肤、眼睛、小便呈淡黄色，食欲不振，身体不适。6个月后肝炎转为复发期。据估计，整个世界都受到一系列病毒性疾病的影响。可能是由于肝炎的危害，更多的酒精和毒品消费是肝炎的来源。与不洁净的血液和液体接触可传播戊型肝炎病毒。患者的唾液、精液和阴道液体，特别是乙肝病毒。丙型肝炎病毒的主要来源是不纯血液。 HBV and HCV has no indication at beginning [2].

B病毒是乙型肝炎的来源，乙型肝炎是一种引起肝细胞损伤的长期激发性疾病。3200个氮基存在于小的环状HBV病毒基因组中。这种病毒的遗传形式排列于(A-E)。HBsAg存在于病毒表面，并在病毒存在时固定。由乙型肝炎引起的严重肝病，约有2.4亿人受其影响，并导致约60万人死亡。经调查证实，乙型肝炎与艾滋病毒疾病具有同质性，与其他未感染艾滋病毒的乙型肝炎患者相比，病情以计算的速度恶化。感染率的增加是由许多因素造成的，包括儿童缺乏疫苗接种或其异常、母亲将勃起的器官传给未出生的婴儿、受感染的输血免疫不良和医务人员[3]。

由于生活水平不理想和健康状况恶化，巴基斯坦居民遭受乙型肝炎感染的迅速传播。67.5%的居民生活在边远地区，易受低商业和社会地位制度的影响。一开始没有肝炎的指征，但症状改善后开始出现，并形成眼睛黄疸、皮肤和下腹疼痛[4]。

性接触、药物注射、输血和注射广泛传播丙型肝炎全世界有2亿人感染丙型肝炎，每年有35万例患者死亡。此外，艾滋病毒影响3690万人，53.1%生活在非洲，特别是沙漠地区。每年，有2.4亿人被乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒所困扰。肝炎病毒的长期感染可引起肝脏杂质、肝衰竭和肝细胞癌变。如果肝炎发病时间少于6个月且肝功能衰竭，就会发生长期肝病。大量服用ATT、头孢菌素的抗惊厥药、类固醇等药物是[5]型肝炎的来源。

乙肝和丙肝感染传播的主要逻辑是注射，因为在巴基斯坦，由于健康状况不佳，人们以前使用过注射。在巴基斯坦，每年要输送150万单位的血液。病毒感染通过注射毒品成瘾的传播而传播。hiv感染者HBV和HCV的波动与社会人口环境和免疫方式的差异有关。

研究目的

这项研究的目的是:

• 分析和估计乙肝、丙肝和艾滋病在习惯性胃肠道紊乱人群中的患病率。
• 了解乙肝病毒、丙肝病毒和艾滋病在习惯人群中的来源优势。
• 在病毒呈阳性的人身上检查危险的东西
• 提高穆扎法拉巴德普通民众的意识。

在穆扎法拉巴德，胃肠道疾病患者是治疗的目标，因为他们大多接受了各种手术、液体渗出等。这些是乙肝、丙肝和HIV输血中的重大危险事件。健康条件差和社会经济条件差的人是传播破坏性疾病的主要原因。对有严重胃肠道疾病的人进行检测，主要是为了发现破坏性疾病的传播。

纳入和排除标准

在这个分析中包括有胃肠道疾病的人。

样本大小和血液取样

静脉穿刺采用常用技术和消毒注射器，抽取患者样本。以每分钟3000-4000转的速度离心血液，提取血清。

年代克里族n检测HBV抗原，HCV和HIV抗体

血液采集采用免疫层析技术。从病人身上抽取5毫升血液。血液采集后被放入试管中。管子在室温下保持不变。最大锻炼10分钟。样品以3000 - 4000转/分旋转5分钟。在使用了凝胶管之后。在室温下，血清储存在凝胶管中。血清中遇到的HBV抗原和HCV抗体。筛查ICT试剂盒用于抗hbsag、抗hcv的早期筛查。 Antigen and antibody hybridization determine ICT methodology. ICT kit having C and T band filled with serum. 3 drops of buffer are added in serum in. If band present at C side, shows people having HBsAg and anti-HCV antibody. It shows if both bands appear on C as well on T side, patient is infected [6].

酶联免疫吸附试验(ELISA)

Oi et at给出的方法。，(2009), is required to be done is ELISA. Buffer solution used to dilute the 100 microliter antibody and placed in well and incubated at 4C for night and covered with plate. Buffer solution B were washes out wells. Empty plates are inverted in a sink at beginning. In each well, ten microliters of test sample were put in buffer B and incubated for two hours at room temperature before being deposited onto the plate. In the buffer solution, 100 microliters of conjugated antibody and enzyme complex were added. The plate was incubated at room temperature for one hour. Each well received 100 microliters of chromogenic substrate C, and the plate was kept dark. To stop reaction 100 microliter of 0.5M H2S04 were added. By using ELISA automated photometer result were read 490nm out from bottom microwell. Standard curve was plotted at 490nm by using logarithm paper [7].

聚合酶链式反应(PCR)

对HBsAg、HCV、HIV阳性病例，采用ICT试剂盒法和ELISA法进行PCR检测。管家底漆stc1。H1R stc1。H1R1用于验证[8]。

在阳性个体中筛选HBV PCR

HBV DNA分离:从HBsAg阳性个体病毒DNA血清中分离，室温孵育5分钟。加入200微升异丙醇和250微升血清。然后以每分钟7000转的速度旋转5分钟，留下清澈的液体。在7000rpm的5分钟内，混合物中70%的乙醇离心，并在开放的地方[9]干燥。通过PCR扩增DNA对HBV表面基因进行研究。检测病毒扩增量分两轮进行。使用试剂示。sct1。H1R引物用于此目的，顺序如下:

正向引物:5-GATCCTGCCTCATCT-3 Tm 60°C

反向:5-TGAAGAATGGCACG-3英国石油(Bp);180

代理	第一轮	第二轮
	体积	体积
缓冲	2.4	2.4
自由水核酸酶	3．3	9.6
氯化镁	1．5	1．5
2.5毫升核苷酸	1.3	1.3
聚合酶	0.2	0.2
DNA模板	10.2	4.4
引物反向(11pole /µL)	1．2	1．2
引物正向(1pmol / L)	1．2	1．2
最后一卷	20.1	20.1

对于变性，PCR在93°C下运行6分钟，然后在93°C下33个循环，每33秒。在53°C下退火40秒，在70°C下退火33秒，最后延伸4分钟。

用PCR法筛选HCV

RNA分离:在凝胶管中放入血清，加入600 μ L异丙萘洛尔。它被轻轻地混合。离心15分钟，11,800转，仔细更换清液。球团用乙醇在空气中洗涤干燥，加入50 μ L的无菌水溶解。

丙型肝炎病毒基因分型:从现有的丙型肝炎病毒基因组设计阳性样本，采用不同的反引物进行基因分型。

反引物:AT (AG) TACCCCATGAG (AG) TCGGC- 3 '

代理	体积
底漆反向	1．2
缓冲	4.4
核苷酸	1．0
核糖核酸	10.3
DEPEC	2.5
转录酶-反向	1．2
抑制剂	0.2
——总额	20.1

在37°C逆转录酶热循环器培养时间为50 min，温度为72℃，温度为6min。为了激活DNA PCR，第一轮采用基础PCR，第二轮采用多重PCR，使用两组引物。其第二次和第二次底漆系列如下;

其一轮PCR扩增，反应混合物:

前-底火:5 ' - gggaggcacatg - 3 '

反向引物:AT (AG) TACCCCATGAG (AG) TCGGC-3 '

第二。

我混合	混合二世
G2a 5“-CGCTCC-3”	G1a 5 ' -GCATAGGACCT 3 '
G2b 5“-GCGAGAC-3”	G3a 5 ' -GTCCCTTCGCT 3 '
G3b 5“-CTTACGTAC-3”	G4a 5 ' -CAACGTCCAT 3 '
	G5a 5“-GAGGAGAGCAA-3”
	G6a 5“-GGTCCAATGT-3”

用ICT KIT方法进行HIV筛查

使用5cc消毒注射器，开始取2ml血液，在ICT试剂盒中加入2-3滴。在ICT设备中添加2或3滴缓冲液。样品在室温下放置5分钟。在试剂盒中，样品运行至T侧形成2条条带。如果在ICT试剂盒中显示出两个条带，则该人的HIV呈阳性

统计分析

采用SPSS 21版统计程序对结果进行分析。计算了变量的个数和比例。

该研究的全部人口为500人，其中233名男性(47.3%)和269名女性(54.6%)。一开始，ICT试剂盒用于检测所有患者的抗- hcv和抗- hiv抗原和抗体。66例ict阳性患者采用ELISA定量检测抗体和抗原匹配情况。在所有34例elisa阳性患者中，用PCR检测相关抗体和抗原的存在。PCR已经完成了34例病例中的28例(91%)。

使用ICT工具包了解乙型、丙型肝炎和艾滋病毒流行情况

Muzaffarabad仅统计了GIT患者，共计500人(232名男性和268名女性)。使用ICT技术检测所有患者的HBsAg、抗- hcv、抗- hiv抗原和相关抗体。65例患者中21例(32.3%)HBsAg ICT阳性，其中男性18例(85.7%)，女性3例(14.3%)。65例抗- hcv抗体ICT阳性人群中，男性42例(64.6%)，女性35例(83.4%)。65例抗hiv抗体ict中2例(3.1%)检测到抗hiv抗体阳性，均为女性。采用ICT方法后，无男性报告抗艾滋病毒抗体阳性。

总人口		整体积极的个体(=500)
501		65例(13%)
		HBsAg		Anti-HCV		抗艾滋病毒
		21 (32.4%)		42 (64.7%)		2 (4.2%)
男性	女	男性	女	男性	女	男性	女
233	269	19(86。%)	4 (15.3%)	8 (17.6%)	36 (85.4%)	----	2 (99%)

ELISA

ELISA定量测定66 ICT阳性人群的抗体和抗原验证较多。从33个抗HCV抗体ICT中，经ELISA检测22(66.6%)为阳性，男性21(95.5%)为阳性，仅01(4.5%)为阳性。通过ELISA定量检测66个ICT阳性的人抗体和抗原均得到较多的验证。34例阳性个体中02例(4.1%)为女性抗HIV抗体阳性(99%)。

总人口		总体积极(n = 66)
501		34 (51%)
		HBsAg		Anti-HCV		抗艾滋病毒
		11 (31.3%)		23 (67.6%)		02 (4.1%)
男性	女	男性	女	男性	女	男性	女
232	268	＿	10 (100%)	21 (95.5%)	01 (4.5%)	--	01 (100%)

聚合酶链式反应(PCR)

表6为33例ELISA阳性患者相关抗体和抗原PCR检测结果。PCR检测结果显示，在33种基因中，有27种(81%)的验证率较高。经PCR检测，HBsAg ELISA阳性个体仅为男性9例(100%)，女性无阳性。ELISA检测27株抗- hcv抗体阳性19例(67.7%)。PCR后阳性19例，男性1例(6.5%)，女性18例(95.5%)。27株抗hiv抗体ELISA阳性个体0(0%)未检出。PCR后，男性和女性的抗hiv抗体均未呈阳性。

总人口		整体积极的个体(n=34)
501		28 (82%)
		乙型肝炎病毒		丙肝病毒		艾滋病毒
		08年(34.3%)		19 (67.7%)		＿
男性	女	男性	女	男性	女	男性	女
233	269	08年(99%)	_——	02 (6.5%)	18 (95.5%)	_——	——_

STC1放大。HBV的H1R基因

引物优化后，在60℃的特定退火条件下进行PCR扩增^oC.在含有溴化乙锭的2%琼脂糖凝胶扩增PCR上。特异性基因产物的大小(180bp)由100碱基对(bp)的体外素阶梯估计。放大Stc1。HIR以频带表示(图1)100 bps

图1:STC1放大。HBV的H1R基因

STC1放大。HCV的H1R1基因

引物优化后，在65℃的特定退火条件下进行PCR扩增^oC为HCV基因。在含有溴化乙锭的3%琼脂糖凝胶上进行PCR扩增。通过Stc1 H1R1的100碱基对(bp)扩增的Invitrogen梯估计特异性基因产物的大小为190个碱基对(图2)。

图2。STC1放大。HCV的H1R1基因

年龄组

人口规模为500人，从10人到40人以上。从65岁开始阳性筛查的患者年龄组为10-20岁、20-30岁、30-40岁和40岁以上。HBV、HCV阳性28例，PCR检测HIV阳性0例。9人(18%)HBV阳性，19人包括27人中的1名男性和18名女性，19人(4.6%)HCV阳性，PCR检测无HIV阳性。20-30岁、30-40岁及40岁以上人群中出现HBV和HCV阳性。

不。	年龄	乙肝病毒发生	丙肝病毒发生	艾滋病毒发生
001	20 - 30	01	01	0
002	30 - 40	07	09	0
003	降价	02	06	0
004	高于50	03	05	0

本分析共500个个体。据估计，54人(11.6%)在意识到448之前知道乙肝和丙肝(90.4%)，在意识到501之后不知道(99%)。肝炎影响肝功能06(2.0%)在意识到之前已知，496(98%)在意识到之后不知道501(99%)发现已知。黄疸是乙肝和丙肝的普遍症状，16人(24.4%)以前就知道。事后发现不知道的384例(77.6%)，知道的479例(96.6%)，不知道的23例(5.4%)。383人(77.4%)知道乙型和丙型肝炎。119人(24.6%)不知道自己是谁。在501例(99%)病例中发现了事后意识。

383例(77.4%)在意识到之前已知肝炎可能通过受污染的体液传播119例(24.6%)意识到之后不知道501例(99%)发现已知。186(38%)乙型肝炎和丙型肝炎通过使用被污染的刀片传播，在意识到之前已知，316(64%)不知道，501(99%)在意识到之后发现。1例(1%)乙型和丙型肝炎在意识到之前由母亲传给后代367例(74.2%)在意识到后发现已知，135例(27.8%)在意识到后不知道。

不。	问题	BEFORE-Awareness		后,意识
		是的	没有	是的	没有
001	听说过乙型和丙型肝炎吗?	54 (10.7%)	448例(88.4%)	501例(99%)	(1%)
002	乙肝和丙肝是病毒性疾病吗?	06 (1.2%)	496例(98%)	501例(99%)	1 (1%)
003	肝炎会影响肝功能吗?	06 (1.2%)	496例(98%)	501例(99%)	1 (1%)
004	黄疸是乙肝或丙肝最常见的症状之一吗?	118例(24.4%)	384例(77.6%)	479例(96.6%)	24 (5.4%)
005	未经消毒的注射器、针头和手术设备是否能够传播乙型或丙型肝炎?	383例(77.4%)	119例(24.6%)	501例(99%)	1 (1%)
006	有可能从受感染的血液或血液制品感染乙肝或丙肝吗?	383例(77.4%)	119例(24.6%)	501例(99%)	1 (1%)
007	是否有可能通过理发师的刀片/耳鼻穿刺感染乙型或丙型肝炎?	186例(38%)	316例(64%)	501例(99%)	1 (1%)
008	乙肝或丙肝有可能由母亲传给孩子吗?	1 (1%)	600例(101%)	367例(74.2%)	135例(27.8%)
009	是否有乙肝疫苗?	06 (2.0%)	496例(98%)	403例(81.4%)	99例(19.7%)

许多危险因素会影响肝炎病毒的传播、牙齿问题的治疗、手术、共用个人物品、去理发店/美容院、医院相关史以及穿孔/纹身。最具影响的风险是去理发店/美容院共用个人物品(100%)，然后是穿刺/纹身(60.6%)，牙科问题治疗(20.4%)，医院相关病史(15.8%)，以及手术(7%)。

11	牙齿问题的处理	是的	103例(21.4%)
		没有	399例(80.6%)
22	手术	是的	36 (8.0%)
		没有	466例(94%)
33	个人分享	是的	600例(200%)
		没有	1 (1%)
44	美容院的访问	是的	600例(200%)
		没有	1 (1%)
55	医院相关的历史	是的	80例(16.8%)
		没有	422例(85.2%)
66	穿刺和纹身	是的	303例(60.6%)
		没有	197例(39.4%)

穆扎法拉巴德是AJK的首都，有着丰富的社会经济背景。500是整体体量标记的个人。结果显示乙型病毒感染率高，尤其是男性，这可能是因为他们更容易受到危险因素的影响。

年龄范围从10岁到40岁以上。为了开始筛选我的标记人群，使用了ICT方法。总居群600只，阳性65只。在ICT技术中，66人中HBsAg 21例阳性，42例抗hcv抗体阳性，2例抗hiv抗体阳性。12%的患者有HBV和HIV感染，14%的患者[11]有HCV和HIV感染。从66人首次筛查阳性，更多的人在ELISA中确认为(HBV, HCV和HIV)阳性。27例(81%)经PCR证实。

HBV、HCV、HIV和累积流行病学在穆扎法拉巴德有胃肠道疾病。HBV流行率介于33.3%、30.3%和33.3%之间。乙肝流行率在AJK的评估发生率中较高，特别是1998年拉合尔为5.06%[12]，2001年卡拉奇为5.47%，2003年为5.84%，2003年品第为3.54%，2005年Isl为2.57%和2.82%，2006年富士基金会医院拉瓦尔品第的患病率为7.56%。HIV流行率从3.1%到很高，相比之下，在1970年代的评估中，大多数HIV和艾滋病阳性病例为0.6%。3%的献血者在[12]开始时受HIV影响。

病毒感染与年龄组有一定的关系，20-30岁年龄组感染较为集中。相比之下，研究人员显示，HBV和HIV在36 - 46岁患者中更为普遍，而HCV和HIV在46岁以上患者中普遍占优势。结果表明，HCV和HIV在30 ~ 50岁男性人群中发病率较高。丙型肝炎和乙型肝炎病毒的传播主要是由于在医疗机构中使用注射，特别是在发展中国家。它显示为500(100%)。这与对203人进行操纵研究的可汗研究是一致的。来访的96人接受了注射。135例患者中，19%抗BV抗体阳性，其血清中有抗hcv抗体[13]。

在旁遮普，人们每年注射4-5次，并受乙型肝炎的影响。与不注射的人相比，这些人受影响的[14]为11.9倍。这些病毒也可以通过血液衍生物传播。与专业献血者相比，自愿献血者HBV患病率较低。(p 0.001) (9% vs. 0.8%)毒品也会传播病毒，巴基斯坦有50万人使用海洛因，其中5000人是经常使用的，15万人是偶尔使用的。在拉合尔和奎达的注射吸毒者中，患病率分别为94%和76%。旁遮普和俾路支省的患病率分别为94%和76%[15]。剃须工具大多转移这种感染，暴露于相同社会因素的人大多感染乙肝病毒。屋内的卫生工具会传播病毒。 Many vulnerable factors cause spread of this virus, and the chance of transfusion of virus is high compared to the transmission of hepatitis C and HIV [16].

许多易受感染的因素导致肝炎病毒的传播，牙齿问题的治疗，手术，共用个人物品，去理发店/美容院，医院相关的历史，穿孔/纹身。最有效的风险是去理发店/美容院共用个人物品(100%)，然后是穿刺/纹身(60.6%)，牙科治疗(20.4%)，医院相关病史(15.8%)和手术(7%)。这些与Qureshi等人(2009)的结论一致，即在分析中明确识别了病毒输血的脆弱因素[17-19]。

这一分析揭示了巴基斯坦乙型和丙型肝炎病毒感染与艾滋病毒感染之间的相关性。在靶向分析中，丙型肝炎的发病率很高。在年轻一代中，脆弱状态下HCV呈阳性。为了阻止这种致命疾病的传播，人们呼吁采取行动。应重视这些致命疾病的有用知识、诊断、治疗和疫苗接种，以减轻这一危险疾病。提高医疗服务水平，提高对感染方式的健康意识，加强疫苗接种，降低了病毒感染率。

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