不同种族胶质瘤患者表皮生长因子受体表达分析

胶质瘤是成人最常见的脑原发肿瘤。胶质瘤患者的5年生存率低得惊人。常规疗法在恶性胶质瘤的治疗中发挥着重要作用。然而，恶性神经胶质瘤患者的预后仍有待改善。近年来，基于胶质瘤分子靶点的新型治疗方法得到了新的发展。识别这些可以预测生存的因素是这些患者治疗的重要目标，大量研究表明VEGF的表达与肿瘤的病理分级明显相关[3-7]。然而，在文献回顾中，没有研究报道VEGF表达水平与病理分类相同的不同民族人群之间的关系。在本研究中，我们比较了定居在中国新疆省的相同分类胶质瘤患者VEGF表达水平的差异，以阐明种族是否影响这些患者的VEGF表达和预后。

本研究经机构伦理委员会批准，采用新疆医科大学附属肿瘤医院2005年1月至2010年12月94例石蜡包埋肿瘤组织标本。男性65例，女性29例，其中汉族61例，维吾尔族33例。本研究的纳入标准为未接受抗肿瘤治疗的新诊断病例。记录患者特征，包括种族、年龄、性别、KPS评分、病理分级和VEGF表达水平。所有样本均选自在我院接受常规治疗、无其他癌症病史、无其他急性或慢性炎症症状的患者。中位年龄44岁(18~75岁)。根据世界卫生组织(WHO) 2000年中枢神经系统肿瘤分级，I级6例，II级28例，III级35例，IV级25例。

使用Dako表皮生长因子受体(EGFR) pharm Dx assay™(Dako，丹麦)对肿瘤标本进行免疫组化检测VEGF表达水平。VEGF表达水平免疫染色评分以肿瘤细胞阳性百分比和染色强度计算。0~9%的核染色率分别为+、10%~49%[2+]和>50%[3+][8]。在双盲条件下评估阳性细胞百分比和染色强度。两名独立的病理学家在不了解病理结果的情况下对每个样本进行检查和评分。VEGF表达评分以阳性评分百分比×染色强度评分计算，评分范围为0 ~ 9。

所有统计分析均采用SPSS 20.0。数值变量被总结为平均值(标准偏差)或中位数(四分位范围)。对于两组之间的比较，分类变量通过卡方检验进行分析。为了阐明两民族胶质瘤VEGF表达水平与病理分级之间的关系，采用列联表检验。显著性定义为P值<0.05。

汉族和维吾尔族胶质瘤患者肿瘤组织中VEGF阳性表达率分别为81.97%和60.61%。两组VEGF表达阳性率比较分析，表达差异有统计学意义(P=0.023)。维吾尔族患者的VEGF表达水平明显低于汉族患者，说明种族因素可以影响胶质瘤患者的VEGF表达(表1)。

R王牌	VEGF		数量
	积极的	负
汉	50 (81.97%)	11 (18.03%)	61
维吾尔族	20 (60.61%)	13 (39.39%)	33
总计	70	24	94

我们分析了汉族胶质瘤患者病理分级与VEGF表达水平的关系。结果显示，VEGF在汉族胶质瘤患者中的表达水平与肿瘤病理分类有显著相关性(P=0.024)(表2)。

病态的年级	汉族胶质瘤患者VEGF的表达				数量
	负	+	++	+++
年级的我	1 (50%)	1 (50%)	0 (0%)	0 (0%)	2
二级	2 (10%)	12 (60%)	5 (25%)	1 (5%)	20.
三级	6 (26.1%)	5 (10%)	9 (21.7%)	3 (9.2%)	23
第四等级	2 (12.5%)	3 (18.8%)	4 (25%)	7 (43.6%)	16
总计	11	21	18	11	61

表3显示了33例维吾尔族胶质瘤患者病理分级与VEGF表达水平的关系。结果显示，VEGF在维吾尔族胶质瘤患者中的表达水平与肿瘤病理分级无明显差异(P=0.683)。

病态的年级	维吾尔族胶质瘤患者VEGF的表达				数量
	负	+	++	+++
年级的我	1 (25%)	1 (25%)	2 (50%)	0 (0%)	4
二级	4 (50%)	1 (12.5%)	2 (25%)	1 (12.5%)	8
三级	4 (33.3%)	5 (41.4%)	2 (16.7%)	1 (8.3%)	12
第四等级	4 (44.4%)	1 (11.1%)	4 (44.4%)	0 (0%)	9
总计	13	8	10	2	33

在I级和II级胶质瘤患者中，汉族人的中位生存期为62个月(22例)，维吾尔族人的中位生存期为69个月(9例)。两组间差异无统计学意义(P=0.125)，即LGG患者的生存时间与种族无明显关系(图1)。

图1:维吾尔族和汉族低级别胶质瘤患者的生存时间差异无统计学意义。

在III级胶质瘤患者中，汉族组(25例)中位生存期为16.2个月，维吾尔族组(10例)中位生存期为28.7个月。两组间差异有统计学意义(P=0.007)。维吾尔族III级胶质瘤患者的平均生存时间长于汉族患者(图2)。

图2:维吾尔族III级胶质瘤患者生存时间长于汉族患者。

在IV级胶质瘤患者中，汉族组(14例)中位生存时间为11.8个月，维吾尔族组(13例)中位生存时间为17.5个月。两组间差异有统计学意义(P=0.007)。维吾尔族胶质瘤IV级患者的生存时间长于汉族患者(图3)。

图3:维吾尔族胶质瘤IV级患者的生存时间长于汉族患者。

血管内皮生长因子可诱导血管新生，增加血管通透性，促进血管内皮细胞[9]的分裂和增殖。VEGF在肿瘤生长过程中也起关键作用[10]。血管内皮生长因子家族多肽生长因子调节VEGF受体酪氨酸激酶家族具有多效下游作用[4]。血管生成是这些效应中最广为人知的。血管生成导致新血管的形成，与生理和病理情况都有关。血管内皮生长因子家族是这一过程的主要中介。在经典霍奇金淋巴瘤(cHL)患者中，检测VEGF-A、VEGFR-1和VEGFR-2的水平，只有VEGFR-2的表达与≥4g/dL的血清白蛋白水平呈正相关。CHL患者[4]与患者预后无相关性。VEGF +936C/T多态性的T等位基因在胶质瘤原发肿瘤中较为常见，但与生存[5]无统计学关系。血管生成通常归因于VEGF- a的反犯罪和旁分泌产生，它上调了VEGF信号转导通路，是[11]胶质母细胞瘤的一个显著特征。VEGF在胶质瘤组织中的分泌量高于正常脑组织[12,13]。 In recent years, the targeted molecular therapy of glioma based on VEGF as the target has gradually become a new strategy [14]. A large number of studies have indicated that VEGF expression level in glioma was closely related to the degree of malignancy of the tumor [15]. The higher the tumor pathological grade is, the higher the level of VEGF expression is [16,17]. Sometimes, The level of expression of some tumor related factors in tumors is closely related to the malignancy of tumors and the prognosis of tumors in Chinese just as Neutrophil-to-Lymphocyte Ratio (NLR) and Platelet-To-Lymphocyte Ratio (PLR) in the glioma, increased preoperative NLR and PLR are associated with worse OS, and NLR may be an independent risk factor to identify glioma patients with poor prognosis [18].

在本研究中，我们对包埋的石蜡标本进行了VEGF免疫组化染色。汉族患者VEGF表达阳性率与肿瘤病理分级显著相关，与其他研究基本一致[19]。但不同的是，维吾尔族患者VEGF阳性表达率明显低于汉族患者。维吾尔族胶质瘤患者病理分级与VEGF表达水平无明显相关性，但病理分级与VEGF表达水平呈正相关。我们推测阴性结果可能与维吾尔族患者数量有限有关。此外，VEGF在HGG中的表达水平明显高于LGG，提示VEGF的表达水平可作为胶质瘤分级的一个指标。

当对不同病理分级的胶质瘤患者进行种族因素分析时，种族在LGG患者生存中的作用无明显差异。但汉族和维吾尔族HGG患者差异明显。因此，种族是影响HGG患者生存的一个因素。

许多研究证实VEGF在肿瘤组织中高度表达。提示VEGF的表达可能与膀胱癌的侵袭性、转移性等生物学特性密切相关。有研究发现VEGF在食管癌中的表达与淋巴转移和浸润深度有关，癌旁组织的表达低于食管癌组织[21]。VEGF的表达是否与子宫内膜疾病的临床特征有关，很多学者提出了不同的观点。如Abulafiao认为血管发生与肿瘤分级无关，而Nakayama则持相反意见[22,23]。他们认为血管生成与其他临床病理参数无相关性，血管生成与肿瘤分级有关，但也有研究发现遗传变异与胶质瘤无相关性。特定的生活习惯和共病是该病的独立危险因素。低级别胶质瘤患者接受TMZ+RT治疗后生存率提高[24,25]。

类似的种族相关的靶标表达也被用于其他分子靶标，如EGFR[7,26]。然而，在晚期非小细胞肺癌患者中，一些比较EGFR抑制剂吉非替尼与安慰剂的III期试验显示，在未选择的人群中，总生存率没有改善[27,28]。亚洲患者在吉非替尼治疗后总生存期有统计学意义上的改善。机制方面，受益于吉非替尼的患者往往存在EGFR基因的体细胞激活突变[29,30]。这些数据说明，分子突变可以用于识别亚群患者，以区分VEGF在汉族和维吾尔族患者中的表达。此外，初步研究分析了贝伐单抗治疗复发性胶质母细胞瘤的疗效，并解释了其临床活性，一线使用贝伐单抗并没有提高总生存期，尽管无进展生存期延长了[30]。因此，我们认为VEGF的表达水平决定了贝伐单抗的反应，并导致不同的疗效。

新疆维吾尔族和汉族胶质瘤患者VEGF表达水平与肿瘤病理分级的相关性有显著性差异。我们认为造成这种差异的原因是种族。由于这种不一致，以VEGF为靶点的分子靶向治疗新疆维吾尔族和汉族胶质瘤患者的疗效是否存在差异，还需要进一步进行大系列研究。

本研究显示维吾尔族和汉族胶质瘤患者胶质瘤组织中VEGF表达水平存在显著差异，但本系列患者数量有限，监测方法可能是导致胶质瘤组织中VEGF表达差异的原因。未来分析贝伐单抗作为靶向VEGF抑制剂在汉族和维吾尔族胶质瘤患者中的疗效差异至关重要。

VEGF:血管内皮生长因子;
HGG:高分级胶质瘤;
LGG:低级别胶质瘤;
表皮生长因子受体。

本研究由广东省医学科技研究基金项目(No.;A2018017)和广州市科技计划项目(批准号201607010365)。

作者声明没有利益冲突。